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m5cMeRIP-seq(甲基化RNA免疫沉淀测序)
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m5cMeRIP-seq(甲基化RNA免疫沉淀测序)
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互作&免疫
基因组学研究
Chip-seq---组蛋白修饰
Chip-seq测序是将染色质免疫共沉淀和高通量测序相结合的技术。通过组蛋白特异性抗体,将带有特定修饰的组蛋白-DNA复合物沉淀下来,从而获取该组蛋白结合的DNA。通过对DNA进行高通量测序,即可获得该组蛋白在染色体上的分布情况。
MeRIP-seq (RNA甲基化测序)
meRIP-seq是参考Chip-seq发展出来的鉴定RNA修饰的一种方法,可以广泛应用于RNA修饰的研究,只要目标修饰存在商业化抗体,就可以针对该修饰进行meRIP-seq研究。目前meRIP-seq已成功应用于:m6A修饰(m6A-seq)、m1A修饰(m1A-seq)、m5C修饰(m5C-seq)
ATAC-seq(染色质可及性测序)
ATAC-seq(Assay for transposase-accessible chromatin sequencing)是目前染色质构象研究的主流工具。其原理是,通过Tn5转座酶在细胞核内的染色质DNA上进行随机转座:开放区域的染色质由于DNA暴露,因此可以发生转座;紧缩区域的染色质由于DNA被压缩折叠,转座酶无法接近,因此不能发生转座。
BS-seq(DNA甲基化测序)
DNA甲基化和去甲基化的动态平衡控制着生物体中基因表达的强度。甲基化可以改变DNA片段的活性,当位于基因启动子中时,DNA甲基化通常起到抑制基因转录的作用。在哺乳动物中,DNA甲基化对于正常发育至关重要,并且与许多关键过程相关,包括基因组印迹,X染色体失活,转座因子阻抑等,DNA甲基化水平的异常会导致疾病发生。
CUT&Tag
CUT&Tag是“Cleavage Under Targets and Tagmentation”的缩写,是一种用来研究蛋白质和DNA之间的相互作用,并确定目标蛋白质的DNA结合位点的方法,其技术目标和Chip-seq类似。CUT&Tag中,首先使细胞膜具有通透性,然后加入目标蛋白的一抗孵育,进而和二抗孵育,最后加入proteinA-Tn5和测序接头的复合物。Tn5将通过pA-
bsRNA-seq(重亚硫酸盐RNA测序)
RNA上目前发现存在着170多种不同类型的转录后修饰,并且所有已知的RNA种类都可以被修饰,其中rRNA和tRNA的修饰最多。mRNA上的主要修饰类型包括m6A、m1A和m5C。m5C修饰是最早发现的RNA修饰之一,最初研究表明主要分布在tRNA和rRNA上,近期研究表明,真核生物的mRNA上也存在m5C修饰,其可以维持mRNA的结构和稳定性、调控翻译过程等。与m6A修饰类似,
m5c MeRIP-seq(甲基化RNA免疫沉淀测序)
RNA上目前发现存在着170多种不同类型的转录后修饰,并且所有已知的RNA种类都可以被修饰,其中rRNA和tRNA的修饰最多。mRNA上的主要修饰类型包括m6A、m1A和m5C。m5C修饰是最早发现的RNA修饰之一,最初研究表明主要分布在tRNA和rRNA上,近期研究表明,真核生物的mRNA上也存在m5C修饰,其可以维持mRNA的结构和稳定性、调控翻译过程等。与m6A修饰类似,
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