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表观遗传学研究
Chip-seq---组蛋白修饰 MeRIP-seq (RNA甲基化测序) ATAC-seq(染色质可及性测序) BS-seq(DNA甲基化测序) CUT&Tag bsRNA-seq(重亚硫酸盐RNA测序) m5c MeRIP-seq(甲基化RNA免疫沉淀测序)
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转录组学研究
绝对定量转录组测序(UMI RNA-seq) mRNA测序 miRNA测序 lncRNA测序 circRNA测序 互作转录组测序
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互作&免疫
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基因组学研究
染色质构象和基因表达
表观遗传学调控主要由3大类调控模式组成:组蛋白修饰、DNA修饰和染色质构象,而前两者也会通过调控染色质构象实现其调控基因表达的功能。
真核生物的染色体由染色质组成,染色质则是由核小体组成。核小体是一个组蛋白8聚体和缠绕在上面的DNA组成的。核小体与核小体之间通过一段linker DNA连接。这些核小体在染色体中处于不同的染色质构象中:
- 常染色质是结构比较松散的染色质,这种松散的结构使得DNA上的调控元件(启动子,增强子等)处于物理可接近的状态,从而可以被转录因子等蛋白结合,进而激活转录过程;
- 异染色质结构比较紧密,DNA被压缩折叠,处于不可接近的状态,从而无法被转录因子等蛋白结合,无法激活转录。
因此,染色质构象是基因表达调控的关键手段之一。
ATAC-seq----染色质构象的研究手段
ATAC-seq(Assay for transposase-accessible chromatin sequencing)是目前染色质构象研究的主流工具。其原理是,通过Tn5转座酶在细胞核内的染色质DNA上进行随机转座:
- 开放区域的染色质由于DNA暴露,因此可以发生转座;
- 紧缩区域的染色质由于DNA被压缩折叠,转座酶无法接近,因此不能发生转座。
转座成功的DNA被加上测序用接头序列,通过PCR扩增、高通量测序和生物信息学分析,染色质开放区域会产生测序reads,而染色质紧缩区域则无测序reads产生:染色质开放程度越高,其测序信号越强。
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代表性结果展示
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