卵巢癌中关键的RBP——SORBS2

作者基于GEO数据库和cBioPortal数据库对卵巢癌相关的已知RBP基因进行筛选， 发现SORBS2显著影响卵巢癌细胞的转移克隆形成能力，SORBS2的低表达与卵巢癌患者不良预后相关。通过细胞实验和动物实验证明敲除SORBS2可增加卵巢癌细胞的迁移和成瘤能力。

寻找SORBS2调控的下游RNA

RIP-seq：为了研究SORBS2结合、调控的靶标RNA，作者使用RNA免疫沉淀结合高通量测序（RIP-seq），即在卵巢癌细胞系A2780中表达带Flag标签的SORBS2蛋白，使用Flag标签抗体进行免疫沉淀，获得的RNA进行高通量测序。

RNA-seq：调节RNA稳定性是RBP调控的方式之一，在这里，作者对RNA的稳定性进行了研究：使用药物α-amanitin鹅膏蕈碱分别处理敲除SORBS2的A2780细胞和对照细胞，抑制RNA合成，在处理0h和9h后提取RNA进行测序、qPCR，分析RNA的稳定性。

RIP-seq和RNA-seq关联分析：被SORBS2结合、且在敲除SORBS2后稳定性降低或不稳定的RNA有91个，这些RNA的稳定性受到SORBS2调控，SORBS2可结合这些RNA并使之更加稳定。这些基因富集到丝粒组装等生物学功能、及FoxO信号通路。

SORBS2调控RNA稳定性并抑制肿瘤转移

作者发现，与肿瘤微环境有关的分泌蛋白WFDC1和IL-17D的RNA在SORBS2敲减后稳定性降低。SORBS2直接结合调节WFDC1和IL-17D的3’UTR区，通过结合3’UTR区域提高两者的稳定性，但是不改变3’UTR的长度，过表达SORBS2可提高RNA稳定。

SORBS2可以增加WFDC1和IL-17D的稳定性，这种调控机制在肿瘤发生中起到怎样的作用？作者敲除SORBS2后，观察到细胞运动能力、细胞侵袭能力增加；若在SORBS2敲除的同时过表达WFDC1或IL-17D，细胞运动能力、细胞侵袭能力则可恢复。动物实验（测转移结节）也得到了相同的结果。

ZnF_C2H2是SORBS2蛋白的关键结构域

SORBS2主要包括三种结构域：SoHo、ZnF_C2H2以及SH3。作者分别针对这3种结构域构建删除突变体重组蛋白，确定SORBS2蛋白依赖ZnF_C2H2结合并稳定转录本，ZnF_C2H2的缺失会导致WFDC1和IL-17D的稳定性降低、SORBS2不能抑制癌细胞迁移和肿瘤转移。

SORBS2影响分泌蛋白和肿瘤微环境

SORBS2敲减会导致分泌蛋白改变，并影响单核细胞向骨髓衍生抑制细胞（MDSC）和M2样巨噬细胞极化。而在敲减SORBS2的同时过表达WFDC1或IL-17D可恢复细胞的正常极化。通过影响单核细胞向骨髓衍生抑制细胞（MDSC）和M2样巨噬细胞的极化，SORBS2稳定的分泌蛋白可以调节肿瘤微环境以进一步调控肿瘤转移。

该研究揭示了RNA结合蛋白SORBS2在卵巢肿瘤转移中的重要生物学作用，表征了通过SORBS2介导的转录本稳定化、将肿瘤微环境中的癌症发展和免疫调节联系起来的新转录后网络，为临床肿瘤患者发展新型诊疗策略提供了理论依据。